MSC(间充质干细胞)的三系分化能力是指其能够在体外特定诱导条件下,分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的能力。这是MSC作为多能干细胞的一个重要特征,也是鉴定MSC的主要方法之一。
MSC的多向分化能力能否通过三系分化检测成功体现出来,这与诱导分化培养基的性能密切相关。本期文章我们将通过了解三系分化鉴定的原理,来体现友康三系分化检测试剂盒的产品性能。
一、成骨诱导分化
▲鉴定原理
MSC向成骨细胞诱导的分化过程可以大致分为骨形成和骨重塑两个阶段。在骨形成阶段,骨髓间充质干细胞会定向分化为骨原细胞,进一步分化为成骨前体细胞,进入快速增殖期。
随着成骨细胞的进一步分化,成熟的成骨细胞表达ECM(细胞外基质)钙化相关蛋白,如骨钙蛋白和骨桥蛋白,长时间的成骨诱导使钙离子以钙盐方式沉淀下来,形成“骨结节”。骨结节可通过茜素红染色,把外面沉积的钙结节染成深红色。
▲友康产品性能
使用友康生物GMP级间充质干细胞无血清培养基(货号NC0106+NC0106.S)培养的P5代MSC进行成骨分化,14天可见钙结节生成,21天钙结节覆盖率90%以上。
二、成软骨诱导分化
▲鉴定原理
MSC向成软骨分化通过MSC聚集成团,团中间的细胞经分裂分化转变成一种大而圆的细胞,即成软骨细胞;接着成软骨细胞转变为成熟的软骨细胞。
通常用阿利新蓝鉴定成软骨细胞分化结果。阿利新蓝属于碱性染料,可与细胞内的核酸结合,使细胞核呈深蓝色;还可与软骨基质中的多糖结合,使软骨细胞和基质呈浅蓝色。
▲友康产品性能
使用友康生物GMP级间充质干细胞无血清培养基(货号NC0106+NC0106.S)培养的P5代MSC进行成软骨分化,诱导分化20天左右阿利新蓝染色即可看见明显蓝色着色。
三、成脂诱导分化
▲鉴定原理
MSC向成脂诱导的分化分为两个阶段,先是MSC分化为脂肪前体细胞,最后分化为脂肪细胞,出现脂肪细胞中显著的标志物——脂肪滴。脂肪滴经油红O染色后在显微镜下呈现显著的红色,未分化细胞则无明显颜色。
▲友康产品性能
使用友康生物GMP级间充质干细胞无血清培养基(货号NC0106+NC0106.S)培养的P5代MSC进行成脂分化,8天时即可初步观察到脂滴形成,12天时染色已有大量脂滴形成。
如此多彩绚烂的三系分化检测结果,不仅体现了友康间充质干细胞三系诱导分化试剂盒出色的产品性能,也证明了通过友康间充质干细胞无血清培养基培养出的干细胞具有强大的生物学效力。友康生物长期致力于干细胞领域的研究,在细胞培养、消化、冻存、三系分化鉴定等多个方面都有出色的产品,下期文章我们将详细介绍友康的干细胞一站式解决方案可以为您的干细胞药物申报之路带来哪些助力。
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