友康生物
2025-04-22
公司热点γδT 细胞作为 T 细胞亚群中的 “特种兵”，凭借其非 MHC 限制性识别抗原的特性，成为近年来免疫治疗领域的焦点，不仅为癌症治疗提供了全新的思路和工具，也吸引着越来越多的科研机构和制药企业投身此领域开展研发。据预测，2025 年全球 γδT 细胞治疗市场规模将突破50 亿美元，中国作为第二大市场，年复合增长率达 28%。
然而γδT 细胞体外扩增瓶颈是其产业化路上亟待解决的问题之一。在这样的背景下，友康生物开发出了γδT 细胞扩增培养试剂盒，搭配全新升级的NK5.0基础培养基，大幅提升了γδT细胞的持续扩增能力，PBMC经过14-16天培养可实现200倍以上细胞扩增、85%以上阳性率，轻松解决了体外扩增难、阳性率低的问题，为γδT细胞疗法的规模化生产和临床应用奠定了坚实基础。
关于γδT培养
1、培养20天最后γδT的纯度是多少？杀伤效率和14天区别大吗？
答：脐带血γδT细胞一般在20天左右成熟，目前只有脐血培养过20天，纯度85%左右，40:1效靶比在90%以上。外周血γδT细胞一般在14-15天即可达到成熟，18天左右表型会开始降低，大概低10%左右。
2、γδT细胞培养的对数生长期大概是什么时间？
答：外周血γδT细胞对数期在d5-d7，尤其d7补完液后会有一个生长高峰。
3、γδT细胞培养的起始浓度必须是2E6吗？
答：γδT的初始接种同样是个范围，推荐接种密度2~2.5E6/mL，过高或过低都会影响收获的数量和阳性率。
4、γδT细胞杀伤实验建议第几小时进行检测？
答：通常4-6小时（短时杀伤）或18-24小时（长期效应）；结合γδT发挥免疫作用的特点，建议考虑孵育8~20h以上进行杀伤检测。
5、脐血可以培养γδT细胞吗？
答：脐血可以进行γδT的培养，然而考虑到脐带血不易获取，因此我们可以优先考虑使用外周血进行培养。
6、在γδT细胞制备过程中，关于一些表面marker检测，要检测哪几项数据？
答：一般使用流式检测，检测CD3+和γδ2TCR+的表达。
7、γδT细胞的培养对血液的新鲜度有要求吗？PBMC冻存复苏后培养γδT会影响比例吗？冻存的PBMC没有自体血浆怎么办？对抗凝剂有要求吗？
答：一般对于细胞培养来说血样越新鲜培养效果越好，对于冻存的PBMC也是可以用于培养γδT的，新鲜和冻存样本无差别，冻存不会影响细胞数量和比例，但是需要保证冻存效果。对于无自体血浆的情况，可以尝试使用AB血浆或血替进行添加。外周血采血的话建议选择肝素钠、肝素锂的采血管。
8、什么办法可以减少GVHD（移植物抗宿主病）？
答：根据文献可知，γδ T细胞因不依赖HLA识别抗原，且部分亚群具有免疫调节功能，理论上GVHD风险较低，当前试剂盒主要培养的γδ2T型细胞，Vδ2+细胞可通过分泌IL-10、TGF-β抑制炎症反应，减轻GVHD，同时保留抗肿瘤活性。或者可以考虑用磁珠法尽量完全去除αβT细胞。
9、γδT细胞可以达到90%的阳性率，那么剩下的是什么细胞？是αβT细胞吗？
答：除γδT细胞，其余的是CD3+T细胞，具体的可以检测下CD4+和CD8+的表型进行最终确定。
10、样本初始的哪些指标与最后纯度有关？
答：一般供体的身体状况、血样的质量、抗凝剂种类、接种密度、培养条件等都会影响最后的收获。初始γδT一般在5%以内，友康γδT细胞扩增试剂盒基本不会受初始表型影响，普遍可以诱导出高比例γδT细胞。
11、γδT细胞杀伤实验的杀伤率大概是多少？
答：将培养14天的γδT细胞做K562肿瘤杀伤检测。共孵育20个小时，效靶比为20:1时，杀伤率64%左右；效靶比为40:1时，杀伤率93%左右。
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