随着疫情防控的常态化,一轮又一轮的大规模高强度核酸检测筛查让核酸提取工作人员叫苦不迭,一款全自动化的设备代替人工是必然的趋势。自动化核酸提取时代,各种品牌的核酸提取仪器争相上市,争奇斗艳地宣称着自家繁杂奇特的工艺设计,亦或花样百出的功能差异。而眼光犀利如我们,透过层层浮华迷雾看向其本质,核酸提取,最重要的是什么?
——当然是稳定,稳定,还是稳定!
俗话说根基不稳,地动山摇。只有稳定性有保障,客户才能放心选择,把核酸提取这个要求严格,步骤繁琐的神圣工作安心交付给智能化仪器。友康全自动核酸提取仪的稳定性可不是重量上的稳定,而是任你不同高低浓度的病毒,任你在不同孔道的地盘上,我的检测精确性稳若泰山岿然不动。
于是友康开展了以下科学严密的实验,用事实与数据来验证友康全自动核酸提取工作站的稳定性——
全自动样本处理与核酸提取工作站提取性能检测
一:实验目的
1、 评价友康全自动样本处理与核酸提取工作站各孔道间提取的重复性及对于不同浓度病毒核酸提取的稳定性。
2、 评价友康全自动样本处理与核酸提取工作站对于不同浓度病毒核酸提取的稳定性。
二:实验设计
1、采用友康全自动样本处理与核酸提取工作站提取病毒的核酸,通过RT-qPCR的检测方法检测核酸相对含量,通过各组Ct值大小计算各复孔间的变异系数以判断孔道间的重复性;对不同的病毒浓度与对应的Ct值进行线性拟合,通过R2的大小判断仪器提取的稳定性。
2、提取病毒的浓度设置6个梯度。每个浓度梯度下设置3个重复,共18个样本。
3、环境场所:机器提取在室内封闭无风空间内完成。
三:操作步骤
1、病毒液的配制。取病毒液细胞复制毒原液1mL。分别取200微升加至3个采样管中,用去600微升。从剩余400μL中取出200μL加至800μL PBS中充分混合,得到1mL病毒稀释液,命名为1级稀释液。分别取200微升1级稀释液加至3个采样管中,用去600微升。从剩余400μL中取出200μL加至800μL PBS中充分混合,得到1mL病毒稀释液,命名为2级稀释液。依次操作,得到3、4、5、6级稀释液。并且每个级别的稀释液加至3个采样管中。共得到18个含有病毒的采样管,分别标记序号,并做好记录。每个采样管中折断一个拭子进去。
2、仪器所需试剂的配制。共需要三种试剂,分别是异丙醇与磁珠的混合液25mL,纯化液50mL,洗脱液15mL。其中异丙醇与磁珠的混合液需要在实验前1小时之内配制出来。
3、将18个加好病毒的采样管随机插入仪器内的孔位并固定好,启动提取程序,进行提取。
5、荧光定量PCR对各组提取得到的核酸进行检测。
四:结果的处理及数据分析
1、各组统计Ct值统计分析:
管号 | 病毒液稀释度 | Ct值 | Ct均值 | 变异系数(CV) |
1 | 5 | 23.92 | 23.83333 | 2.20% |
2 | 24.31 | |||
3 | 23.27 | |||
4 | 52 | 26.53 | 26.40333 | 0.42%
|
5 | 26.32 | |||
6 | 26.36 | |||
7 | 53 | 28.52 | 28.70667 | 1.22%
|
8 | 29.11 | |||
9 | 28.49 | |||
10 | 54 | 30.73 | 31.33667 | 1.70%
|
11 | 31.73 | |||
12 | 31.55 | |||
13 | 55 | 32.58 | 33.4
| 2.26%
|
14 | 34.07 | |||
15 | 33.55 | |||
16 | 56 | 37.08 | 35.74667 | 3.27% |
17 | 34.90 | |||
18 | 35.26 |
2、对病毒浓度的对数值与Ct值之间进行线性拟合结果:
五:实验结论
1、 相同浓度下的各组复孔间提取得到的核酸变异系数均在5%以下,说明该设备的各孔道间具有较好的重复性。
2、 不同浓度的病毒液利用该设备提取得到的核酸进行PCR,得到的Ct值与病毒浓度对数之间呈现较好的线性关系,R2=0.999,说明该设备对于不同浓度病毒核酸的提取表现稳定。
六:友康生物定不负您的选择
现今的全自动核酸提取市场百家争鸣,然而大量机构仍然选择人工或半人工提取,是对全自动集成化产品的不信任,对如此精细化的工作机器能否代替人表示怀疑。友康在病毒样本处理的细分领域已精耕细作16年,我们了解核酸提取工作的每一个细节,开发的全自动样本处理与核酸提取工作站FE4800将会用数万次测试与实验证明它的稳定性,不负每一位客户的选择!