细胞培养基是细胞培养好坏的重要决定因素。近二十年来,无血清培养基越来越受到重视。它不含动物血清或其他生物提取液,仍可使细胞在体外较长时间生长、增殖或维持。它继天然培养基、合成培养基之后发展而来,尤其应用于哺乳动物细胞的大规模工业培养。同时,它也是研究细胞生长、增殖、分化及基因表达调控的有力工具。
常规培养基在基础培养基中添加了一定量的血清或组织提取物,它存在以下优缺点:
优点:
(1)血清作为天然培养基,含有丰富全面的细胞生长必需的营养,具有极为重要的功能。
(2)提供维持细胞指数生长的激素、生长因子以及一些低分子营养物。
(3)提供的结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,调节其活性。
(4)提供的结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
(5)是细胞贴壁、铺展所需的因子来源。
缺点:
(1)血清有时含有细胞生长抑制因子和毒性因子,存在潜在毒性。
(2)血清获取成本高,价格较贵。
(3)血清由于成分不太明确,给细胞培养的标准化带来困难,同时也给细胞表达的目的产物纯化带来困难。
由于常规培养基存在的上述问题,无血清细胞培养基的开发和应用渐成趋势。无血清培养可在很大程度上可以避免血清所带来的不利,但它同时也有一些不足。其优缺点具体如下:
优点:
(1) 其组成明确,可避免血清不同批次带来的质量变动,提高可重复性。
(2)避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染风险。
(3)避免血清不明组分对实验研究的影响。
(4)有利于体外培养细胞的分化。
(5)可提高细胞产物的表达水平并易于纯化。
缺点:
(1)细胞在无血清培养基中易受某些机械和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。
(2)成本较高。
(3)针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。
(4)无血清培养基由于营养不如血清全面,可能存在潜在的营养不足。